Микрофотография

От макросъемки до микрофотографии лишь один шаг. При макросъемке изображение проецируется на негатив объективом; при микросъемке оно образуется оптической системой микроскопа. Для этой цели подходит не каждый окуляр. Наилучшие результаты получаются при использовании специальных исправленных окуляров.

Фотоаппарат укрепляется, как правило, непосредственно на микроскопе (рис. 243). Если применяется незеркальная камера, то между микроскопом и аппаратом устанавливается специальная зеркальная приставка. Можно пользоваться также универсальной приставкой; поскольку при этом аппарат не соединяется жестко с микроскопом, необходимо исключить всякие сотрясения в процессе съемки так как при увеличении они будут сказываться особенно сильно. На окуляр микроскопа надевают светозащитную манжету, в которую свободно входит передняя часть фотоаппарата. При этом тонкая фокусировка микроскопа не затрудняется. Очень важно установить микроскоп так, чтобы он не подвергался ни малейшим толчкам и колебаниям.

При фокусировке нужно иметь в виду, что глубина резкости в данном случае далека от обычных величин и составляет лишь доли миллиметра. При сильных увеличениях нельзя получить резкое изображение всего объекта, а лишь определенного его слоя. Путем диафрагмирования существенно увеличить глубину резкости также не удается. Вообще диафрагмирование не должно быть очень большим, так как в противном случае снижается разрешающая сила объектива. Между тем, микрофотография, задачей которой является воспроизведение мельчайших деталей, требует особенно высокой разрешающей силы оптики.

Рис. 243. Соединение камеры 'Пентакон' с микроскопом с помощью зеркальной приставки

Обычно в микрофотографии применяется постоянный источник света; необходимые выдержки определяются путем нескольких проб. Особенно пригодны для этой цели цейссовские микроосветители типа Д и Е - первые только для съемок в проходящем свете, вторые - в проходящем и отраженном. Эти осветители укрепляются на штативе микроскопа с помощью Т-образного кронштейна так, что расстояние их до осветительного зеркала остается постоянным. Осветитель типа Е находится, кроме этого, на небольшом столбчатом штативе, позволяющем перемещать источник света по высоте.

В микрофотографии не существует каких-либо общеупотребительных выдержек. Экспонометры также не дают достоверных результатов, так как они охватывают значительно большую площадь, чем предметное поле микроскопа. В качестве вспомогательного средства может применяться только светоизмерительное устройство фирмы "Игаже". Обычно же приходится прибегать к методу проб, варьируя выдержки в соотношении 1 : 4 : 8 : 16 : 32.

На рис. 244 - 246 представлены примеры образцово выполненных микрофотографий, дающие представление о высокой степени достижимого разрешения.

Рис. 244. Диатомеи и водоросли. На снимке хорошо видна микроструктура диатомеи. Фото доктора медицины Г. Горинга (Рохлитц), 'Экзакта Варекс', 'Периплан окуляр' 8х, sup1/sup/sub2/sub сек

Рис. 245. Трихина в мясе. Фото доктора медицины Г. Горинга (Рохлитц), 'Экзакта Варекс', 'Периплан окуляр' 8x; ¹/₂ сек. Спиралевидное тело трихины ясно различается внутри капсулы

Для съемки быстро движущихся объектов при сильных увеличениях электрическое освещение оказывается недостаточным. В таких случаях пользуются электронными импульсными лампами. Газоразрядную трубку лампы-вспышки помещают или непосредственно под ирисовой диафрагмой конденсора микроскопа, или прямо перед рефлектором осветительной лампочки микроскопа. Сначала включают лампочку микроскопа и при ее свете, свободно проходящем сквозь газоразрядную трубку, производят фокусировку и наблюдают за движущимся объектом, а в момент съемки срабатывает вспышка.

Рис. 246. Трипанозома Крузи - возбудитель тропической болезни Шагаса. Этот жгутиконосец по внешнему виду напоминает возбудителя сонной болезни. Фото доктора медицины Г. Л. Келлинга (Иена). 'Экзакта Варекс', приставка для фазо-контрастной съемки (фирма 'Цейсс'). Снимок сделан в масляной среде. Увеличение 2300 x. Засняты живые инфузории в крови мышей, зараженных трипанозомой. Темные круглые тела - это красные кровяные тельца, количество которых вследствие истощения крови очень мало. В теле трипанозом ясно видны ядра и пищеварительные вакуоли. Жгутикообразные мембраны, находящиеся в движении, на снимке слегка нерезки

Скорость затвора "Экзакты" при пользовании электронной импульсной лампой должна быть ¹/₅₀ сек. Если лампа микроскопа настолько ярка, что создает опасность передержки, ее притемняют серым фильтром. При съемке светлых объектов этот фильтр может понадобиться также для уменьшения силы света импульсной лампы, так как ее яркость не регулируется, а расстояние до объекта остается неизменным.

Рис. 247. 'Экзакта Варекс' с приставкой 'Колпофот' для съемки в полости рта и зева. Применяется для диагностики и изучения раковых заболеваний

Рис. 248. 'Экзакта Варекс' в соединении с цистоскопом позволяет фотографировать внутренние полости человеческого организма, например мочевой пузырь

Рис. 249. Карциноматозное новообразование в слизистой оболочке прямой кишки. 'Экзакта Варекс', 'S-Teccap' 6,3/120 в специальной оправе; призменныи видоискатель с лупой; электронная лампа-вспышка 2500 в; улитковидная газоразрядная трубка с конической насадкой. Штатив типа 'Гигант' с поворотной головкой; растяжной мех, промежуточный тубус 30 мм; ректоскоп длиной 10 см и диаметром 20 мм; штатив с клеммой для крепления конца ректоскопа. Пленка 'Агфа-Изохром', диафрагма 22

При нажатии на спусковую кнопку падает зеркало и срабатывает шторный затвор, причем первая шторка открывает кадровое окно, проходя все поле примерно за 16 мсек. В следующий момент срабатывает контакт импульсной лампы, которая дает практически моментальную вспышку света. Через несколько миллисекунд вторая шторка закрывает кадровое окно.

Рис. 250. Папилломатоз твердого нёба, подозрительный на раковое перерождение

Рис. 251. Передний зуб с горизонтальными трещинами. 'Экзакта Варекс' с приставкой 'Колпофот'; электронная лампа-вспышка. Пленка 'Агфа-Флюорапид', диафрагма 45; скорость затвора 1/50 сек, экспозиция (длительность горения вспышки) ¹/₅₀₀ сек

С помощью электронных импульсных ламп, обеспечивающих очень короткие экспозиции, можно получать резкие изображения быстро движущихся инфузорий не только на черно-белой, но и на цветной пленке. На рис. 246 показан трудно выполнимый снимок возбудителя болезни, живущего в крови человека,- трипанозомы Крузи. Она очень быстро передвигается в слое микроскопического препарата, постоянно изменяя как свое положение в кадре, так и расстояние от объектива. Снимки подобных объектов выполняются лишь с помощью зеркального аппарата. В связи с большим увеличением источник света должен быть достаточно мощным, чтобы можно было снимать при выдержке ¹/₁₀₀ сек и менее.

Попутно необходимо отметить, что электронные лампы-вспышки применяются также в макрофотографии и репродуцировании. В этих случаях пользуются преимущественно "кольцевыми" вспышками, у которых газоразрядная лампа и рефлектор располагаются кольцом вокруг объектива. Такие вспышки обеспечивают бестеневое освещение объекта прямым светом.

Для медицинских целей разработаны специальные приборы. Так, применяется универсальная удлинительная приставка Цейсса в комбинации с дополнительными приспособлениями (рис. 247). При соединении фотоаппарата с цистоскопом (рис. 248) производится эндоскопическая съемка - фотографирование внутренних органов человека (рис. 249 - 251), например мочевого пузыря. Во всех этих случаях объект визируется вплоть до момента съемки по матовому стеклу зеркальной камеры.